Klenow与t4dna聚合酶的主要区别在于Klenow片段是大肠杆菌DNA聚合酶1的大片段,而t4dna聚合酶是噬菌体T4的DNA聚合酶1。
DNA聚合酶是一种酶,通过在已有引物的3′-OH端加入脱氧核糖核酸来催化DNA的形成。有不同类型的DNA聚合酶。大多数用于分子生物学的DNA聚合酶都是原核DNA聚合酶。Klenow片段和t4dna聚合酶是两种具有原核起源的DNA聚合酶。Klenow片段是由枯草杆菌蛋白酶将大肠杆菌DNA聚合酶1切割成两个片段而产生的大片段。t4dna聚合酶是T4噬菌体的DNA聚合酶1。Klenow和t4dna聚合酶均具有5′→3′聚合酶和3′→5′核酸外切酶活性。它们都缺乏5′→3′核酸外切酶活性,更适合于分子生物学的许多应用。
目录
1. 概述和主要区别
2. 现在是什么
3. 什么是T4 DNA聚合酶
4. Klenow与t4dna聚合酶的相似性
5. 并列比较-Klenow与T4 DNA聚合酶的表格形式
6. 摘要
什么是克莱诺(klenow)?
Klenow片段是一种在分子生物学中有用的DNA聚合酶。当大肠杆菌DNA聚合酶1被细菌蛋白酶(subtilisin)水解时,会产生两个片段:一个是大片段,另一个是小片段。Klenow片段是大小为68kda的大片段。Klenow片段具有DNA PolⅠ的5′→3′聚合酶和3′→5′核酸外切酶(校对)活性。Klenow片段的3′→5′核酸外切酶活性有助于在聚合过程中去除错误添加的碱基。Klenow片段不含5′→3′核酸外切酶活性,由全长或完整的大肠杆菌DNA聚合酶1表达。当仅需要聚合活性时是有利的。Klenow片段用于填充5'外伸、探针合成、DNA测序、双链DNA合成、cDNA第二链合成和定点突变。
在某些应用中,Klenow片段的3′→5′核酸外切酶活性也变得不理想。它可以通过在编码Klenow片段的基因中引入突变来去除。由此产生的Klenow片段称为exo Klenow片段。因此,exo-Klenow片段仅具有大肠杆菌聚合酶1的5′→3′聚合酶活性。
什么是t4 dna聚合酶(t4 dna polymerase)?
t4dna聚合酶是一种催化DNA合成的DNA聚合酶。它是一种由噬菌体T4编码的蛋白质。在结构上,t4dna聚合酶是一种898个氨基酸残基的蛋白质(分子量为103.6kda)。它需要一个模板和一个引物来催化合成。
与Klenow片段相似,t4dna聚合酶同时具有5′→3′聚合酶和3′→5′核酸外切酶活性。此外,它还缺乏5′→3′核酸外切酶活性。t4dna聚合酶可用于DN**段5′突端的填充。也常用于双链DNA的5′端或3′端标记。t4dna聚合酶常用于钝性克隆。t4dna聚合酶的3′→5′核酸外切酶(校对)活性比Klenow片段强200倍以上。最重要的是,t4dna聚合酶具有高的过程性(每秒400个核苷酸)。
克莱诺(klenow)和t4 dna聚合酶(t4 dna polymerase)的共同点
- Klenow和t4dna聚合酶是两种原核聚合酶。
- 两种聚合酶都具有5′→3′聚合酶和3′→5′核酸外切酶活性。
- 它们不具有5′→3′核酸外切酶活性。
- 这两种酶都需要模板和引物来催化DNA的合成。
- 这些酶在75 0℃下可被热灭活
克莱诺(klenow)和t4 dna聚合酶(t4 dna polymerase)的区别
Klenow和t4dna聚合酶之间的关键区别在于每种酶的来源。Klenow片段来源于一种细菌,而t4dna聚合酶来源于一种病毒噬菌体。t4dna聚合酶比Klenow片段具有更高的过程性。此外,t4dna聚合酶比Klenow片段具有较强的校对活性。因此,这是Klenow和t4dna聚合酶之间的另一个区别。
下面的信息图表以表格形式列出了Klenow和T4 DNA聚合酶之间的更多差异。
总结 - 克莱诺(klenow) vs. t4 dna聚合酶(t4 dna polymerase)
Klenow片段是大肠杆菌DNA聚合酶1的一个大片段。它只有5′→3′聚合酶和3′→5′核酸外切酶活性。缺乏完整大肠杆菌DNA pol1的5′→3′核酸外切酶活性。因此,Klenow片段是一种细菌聚合酶。另一方面,t4dna聚合酶是由噬菌体T4编码的聚合酶。与Klenow片段相似,它同时含有5′→3′聚合酶和3′→5′核酸外切酶活性,缺乏5′→3′核酸外切酶活性。然而,t4dna聚合酶比Klenow片段具有更高的过程性和校对活性。所以,这是Klenow和t4dna聚合酶的关键区别。
引用
1DNA聚合酶,T4.《DNA聚合酶,T4–沃辛顿酶手册》,可在此处获得。2。丽蒂,劳尔和伯纳德·佩巴尔。“分子生物学中使用的酶:有用的指南”,《细胞通讯与信号学杂志》,荷兰施普林格出版社,2008年6月,可在这里查阅。
2丽蒂,劳尔和伯纳德·佩巴尔。“分子生物学中使用的酶:有用的指南”,《细胞通讯与信号学杂志》,荷兰施普林格出版社,2008年6月,