关键区别——phusion与taq聚合酶
DNA聚合酶是分子生物学技术中广泛使用的酶,在所有进行DNA复制的生物体中也自然存在。它们是复制过程中涉及的关键聚合酶。DNA聚合酶能够在DNA链的3'末端添加核苷酸,从而引起新链的延伸。目前,由于分子生物学在疾病诊断和工业应用方面的发展,制备具有多种有益性质的聚合酶具有重要意义。这提高了方法的准确性,使之成为一种更快速的技术。Phusion和Taq聚合酶是两种商业化生产的耐热聚合酶酶,用于特殊的分子应用。Phusion是从糠秕热球菌中分离出的一种DNA聚合酶,主要用于克隆实验以提高保真度。Taq-DNA聚合酶是聚合酶链反应(PCR)中使用的标准DNA聚合酶,它是从耐热细菌Thermus aquaticus中分离出来的。这两种酶的关键区别在于来源微生物。Phusion是从极端微生物糠秕热球菌中分离出来的,而Taq聚合酶是从嗜热菌Thermus aquaticus中分离出来的。
目录
1. 概述和主要区别
2. Phusion是什么
3. 什么是Taq聚合酶
4. Phusion和Taq聚合酶的相似性
5. 聚合酶链式比对
6. 摘要
什么是普希(phusion)?
Phusion-DNA聚合酶是一种新型的聚合酶,是从极端古生菌糠秕焦球菌(pyrococcusfuriosus)中分离得到的一种新型聚合酶。这些微生物存在于极高的温度条件下,从而使聚合酶成为一种高度热稳定的聚合酶。Phusion聚合酶比传统的耐热聚合酶Taq聚合酶获得了极高的保真度。Phusion聚合酶能够扩增出高达7.5kb的基因组DNA长模板。Phusion聚合酶的最佳聚合能力是在720℃。Phusion还可用于克隆测序、表达分析和突变分析。
Phusion DNA聚合酶具有3'-5'核酸外切酶活性。这允许在合成后对新合成的链进行校对。因此,核苷酸错配很容易修复。因此,它具有较小的错误率。Phusion聚合酶的总体优势是:;
- 极度忠诚
- 速度快,延长时间缩短
- 反应灵敏,需要最少的优化
- 高产
Phusion聚合酶的主要缺点是它在脱氧尿苷三磷酸(dUTP)的存在下被抑制。当dUTPs积累在反应混合物中时,可能会抑制Phusion聚合酶的作用。通过在添加酶之前用dUTPase处理反应混合物可以防止这种情况。目前,一种叫做Pfu-Turbo的抗dUTP的Phusion聚合酶变体被用来代替Phusion聚合酶来解决这个问题。
什么是Taq聚合酶(taq polymerase)?
taqdna聚合酶的发明彻底改变了分子生物学领域。它解决了DNA扩增的一个主要问题。taqdna聚合酶是从嗜热菌Thermus aquaticus中提取和分离的一种热稳定的聚合酶酶。这种酶的发现导致了PCR的发展。这种酶使聚合酶链反应代替传统的费力的克隆技术在DNA扩增中得到了应用。目前,PCR技术在分子诊断、农业和工业领域得到了广泛的应用。
Taq-DNA聚合酶在720℃-800℃的最佳温度范围内发挥作用。taqdna聚合酶需要一个辅助因子,即镁。Taq聚合酶不具备3'-5'的校对能力,因此,与Phusion聚合酶等较新类型的DNA聚合酶相比,Taq-DNA聚合酶的错误率较高,由于酶的方便性和灵活性,Taq-DNA聚合酶在科学界的流行程度保持不变。
普希(phusion)和Taq聚合酶(taq polymerase)的共同点
- Phusion和Taq聚合酶都是聚合酶,能够在DNA链的3'自由端添加核苷酸。
- Phusion和Taq聚合酶都需要一个启动聚合的引物序列。
- Phusion和Taq聚合酶都是热稳定的。
- Phusion和Taq聚合酶都用于PCR扩增DNA。
- 在将聚合酶加入反应混合物时,最后加入Phusion和Taq聚合酶,以确保酶的效率。
- Phusion和Taq聚合酶都是为分子生物学实验目的而商业化合成的。
- Phusion和Taq聚合酶都需要辅因子来完成其功能。
普希(phusion)和Taq聚合酶(taq polymerase)的区别
Phusion与Taq聚合酶 | |
Phusion是从糠秕热球菌中分离出的一种DNA聚合酶,主要用于克隆实验以提高保真度。 | Taq-DNA聚合酶是聚合酶链反应(PCR)中使用的标准DNA聚合酶,它是从耐热细菌Thermus aquaticus中分离出来的。 |
源生物 | |
Phusion是从极端古生菌-糠秕焦球菌中提取的。 | 这些文学作品从殖民时期到非殖民化时期。 |
校对能力 | |
Phusion具有3'-5'校对能力。 | Taq聚合酶缺乏3'-5'校对能力。 |
忠诚 | |
高保真与Phusion在一起。 | Taq聚合酶保真度低。 |
放大 | |
Phusion能够扩增长的DN**段。 | Taq聚合酶能够扩增出更短的DN**段。 |
杜仲中毒 | |
Phusion作用被累积奇数抑制。 | Taq聚合酶不被dUPT抑制。 |
总结 - 普希(phusion) vs. Taq聚合酶(taq polymerase)
Phusion和taqdna聚合酶是两种用于PCR技术的热稳定聚合酶。Phusion是从极端微生物糠秕热球菌中分离出来的一种聚合酶,而Taq是从耐热细菌Thermus aquaticus中分离出来的。taqdna聚合酶的发现导致了PCR的发明。与Taq相比,Phusion有许多优势,这使得Phusion成为生产高保真DNA的更好选择。然而,Taq聚合酶仍然是PCR的标准聚合酶。这就是Phusion和Taq聚合酶的区别。
引用
1.新英格兰生物实验室。新英格兰生物实验室:生命科学工业用试剂。这里有2。“Phusion DNA聚合酶。”新英格兰生物实验室。这里有
2.“Phusion DNA聚合酶”,新英格兰生物实验室