pcr(pcr)和dna测序(dna sequencing)的区别

PCR和DNA测序是分子生物学中的两项重要技术。聚合酶链反应（PCR）是一个产生大量DN**段拷贝的过程。DNA测序是一种技术，它能精确地确定给定DN**段的核苷酸顺序。这是PCR和DNA测序的关键区别。PCR是DNA测序的主要步骤之一。

内容1。概述和主要区别2。什么是PCR3。什么是DNA测序4。并排比较——PCR与DNA测序5。摘要

什么是pcr(pcr)？

聚合酶链反应（PCR）是一种用于分子生物学的DNA扩增技术。它能产生数千到数百万个特定DN**段的拷贝。这种方法是由Kary Mullis在1983年开发的。该技术以待扩增的DN**段为模板，DNA聚合酶酶将互补核苷酸加入到PCR混合物中的引物中。在PCR反应结束时，许多样本DNA被合成。

PCR混合物有不同的成分，包括DNA、DNA聚合酶（Taq聚合酶）、引物（正向和反向引物）、核苷酸（DNA的构建块）和缓冲液。PCR发生在PCR机器内，正确的PCR混合物应装入机器，并驱动正确的程序。这项技术可以从非常少量的DNA中生产出数千到数百万个特定DN**段的拷贝。

PCR反应以循环方式发生，在凝胶上产生可见数量的PCR产物。PCR反应有三个主要步骤，即变性、引物退火和链延伸，如图01所示。这三个步骤发生在三种不同的温度下。DNA通过互补碱基之间的氢键以双链形式存在。在暗示之前，双链DNA应该彼此分离。它是通过高温来完成的。在高温下，双链DNA变性为单链。然后引物应该更靠近特定片段或DNA基因的两侧末端。引物是一小段单链DNA，与目标序列互补。在退火温度下，用互补碱基在变性样品DNA的两侧末端退火。底漆应耐热。一旦引物与样本DNA退火，taq聚合酶酶通过添加与靶DNA互补的核苷酸来启动新链的合成。Taq聚合酶是一种热稳定的酶，从一种叫Thermus aquaticus的嗜热细菌中分离出来。PCR缓冲液维持了taq聚合酶作用的最佳条件。重复这三个阶段的PCR反应，以产生所需数量的PCR产物。每次PCR反应后，DNA拷贝数加倍。因此，在PCR中可以观察到指数扩增。PCR产物可以用凝胶电泳观察到，并且可以纯化以备进一步研究。

图01：PCR反应的主要步骤

PCR在医学和生物学研究中是一种有价值的工具。PCR在法医学中有着特殊的价值，因为它可以从罪犯的微小样本中扩增DNA，并**法医DNA图谱。PCR广泛应用于基因分型、基因克隆、突变检测、DNA测序、DNA微阵列和亲子鉴定等分子生物学领域。

图02：聚合酶链反应

什么是dna测序(dna sequencing)？

DNA测序是对给定DN**段中核苷酸的精确顺序进行测定，即腺嘌呤、鸟嘌呤、胞嘧啶和胸腺嘧啶。遗传信息是用正确的核苷酸顺序存储在DNA序列中的。因此，找到DN**段中核苷酸的精确顺序对于了解基因的结构和功能是非常重要的。

DNA测序协议涉及不同的过程。第一步是从生物体中分离出感兴趣的DNA或基因组DNA。使用PCR（如上所述），需要的DNA区域应该被扩增。扩增产物经凝胶电泳分离纯化。扩增片段被用作测序的模板。测序可以按照Sanger测序或高通量测序方法进行。桑格测序需要对产生的DN**段进行毛细管电泳。确定正确的核苷酸顺序可以通过人工阅读放射自显影或使用自动DNA测序仪来完成。

2003年，基因测序为人类基因组计划做出了贡献，并促进了人类基因组的绘制。在法医学中，DNA测序可以识别出显示独特DNA序列的个人，并识别罪犯。在医学上，DNA测序可以用来检测基因和其他疾病的基因，找到缺陷基因并用正确的基因替换它们。在农业上，一些微生物的DNA测序信息被用来生产具有经济特性的转基因作物。

图03：DNA测序

pcr(pcr)和dna测序(dna sequencing)的区别

PCR与DNA测序
PCR过程产生了成千上万到数百万份感兴趣的DN**段。	DNA测序是确定给定DN**段中核苷酸的精确顺序的过程。
结果
PCR产生数千到数百万份特定DN**段的拷贝	这导致特定DN**段中碱基的顺序正确。
ddNTPs的参与
PCR不需要ddNTPs。它使用dNTPs。	DNA测序要求ddNTPs终止链形成。