布拉德福德(bradford)和洛瑞蛋白測定(lowry protein assay)的區別

bradford和lowry蛋白質分析的關鍵區別在於,bradford蛋白質分析是基於染料考馬斯亮藍G-250的吸光度變化,而lowry蛋白質分析是基於肽鍵氧化產生的銅離子(Cu+)與Folin–Ciocalteu試劑的反應。...

bradford和lowry蛋白質分析的關鍵區別在於,bradford蛋白質分析是基於染料考馬斯亮藍G-250的吸光度變化,而lowry蛋白質分析是基於肽鍵氧化產生的銅離子(Cu+)與Folin–Ciocalteu試劑的反應。

分析是一種分析技術,有助於確定樣品的主要功能成分。因此,分析可以是定性或定量測試。包括檢驗醫學、藥理學、環境生物學、分子生物學、生物化學和免疫學等許多領域都經常使用這種檢測方法。Bradford和Lowry蛋白質測定法是兩種測定樣品溶液中蛋白質濃度的生化分析方法。兩種分析都使用比色技術來提供結果。

目錄

1. 概述和主要區別
2. 什麼是布拉德福德蛋白質測定法
3. 什麼是Lowry蛋白測定法
4. Bradford法與Lowry法的相似性
5. 並列比較-布拉德福德與洛瑞蛋白質分析表形式
6. 摘要

什麼是布拉德福德蛋白質測定(bradford protein assay)?

Bradford蛋白質分析法是一種快速的蛋白質光譜分析方法。它在測定溶液中蛋白質濃度時顯示出很高的精確度。Marion Bradford在1976年介紹了這個程序。在這項分析中,總反應是基於所測蛋白質的氨基酸組成。換句話說,布拉德福德蛋白質測定法是一種比色法。它使用考馬斯亮藍染料。因此,這種比色蛋白質測定依賴於染料的吸光度變化。考馬斯亮藍G-250有三種形式:陽離子(紅色)、陰離子(藍色)和中性(綠色)。在酸性條件下,染料的紅色形式轉化為藍色。它證實了蛋白質的結合。如果蛋白質不存在,溶液可能保持棕色。

布拉德福德(bradford)和洛瑞蛋白測定(lowry protein assay)的區別

圖01:布拉德福德蛋白質分析

Bradford蛋白質分析法與其他蛋白質分析法不同,因為它不易受到蛋白質溶液中各種化合物的干擾。這些化合物包括鈉、鉀、葡萄糖和蔗糖等。

什麼是洛瑞蛋白測定(lowry protein assay)?

Lowry蛋白質測定法是一種用於測定溶液中蛋白質總量的生化分析法。奧利弗·洛瑞是1940年發明這種試劑的人。該程序通過顏色變化描述溶液的總蛋白質濃度,該顏色變化與溶液中的蛋白質濃度成比例。因此,這也是一個比色蛋白質測定。

肽鍵氧化產生的銅離子(Cu+)與Folin–Ciocalteu試劑之間的反應是該過程的基礎。本試劑還含有磷鉬酸和磷鎢酸。然而,Lowry蛋白分析的反應機理尚不清楚。但它涉及到半胱氨酸、色氨酸和酪氨酸殘基的氧化作用。

布拉德福德(bradford)和洛瑞蛋白測定(lowry protein assay)的區別

圖02:Lowry蛋白質分析

半胱氨酸殘基對Lowry蛋白質分析中觀察到的吸光度有貢獻,反應產生一個明亮的藍色分子;雜多鉬藍。在660nm處用吸光度法測定該分子的還原度。因此,降低Folin-Ciocalteu試劑的半胱氨酸和色氨酸殘基的濃度可推斷溶液中蛋白質的總濃度。

布拉德福德(bradford)和洛瑞蛋白測定(lowry protein assay)的共同點

  • Bradford和Lowry蛋白質分析測定溶液中的蛋白質濃度。
  • 兩種方法都是比色法。
  • 而且,兩種方法的靈敏度都很高。

布拉德福德(bradford)和洛瑞蛋白測定(lowry protein assay)的區別

Bradford和Lowry蛋白質分析是兩種測定溶液中蛋白質濃度的分析方法。Bradford蛋白質分析依賴於染料考馬斯亮藍G-250的吸光度變化,而Lowry蛋白質分析則依賴於肽鍵氧化產生的銅離子與Folin–Ciocalteu試劑的反應。所以,這是布拉德福德和勞裡蛋白質分析的關鍵區別。Bradford蛋白質分析需要15分鐘才能得出結果,而Lowery蛋白質分析則需要40-60分鐘才能得出結果。因此,這是Bradford和Lowry蛋白質分析的另一個區別。此外,Bradford蛋白分析依賴於氨基酸組成,而Lowry蛋白分析部分依賴於氨基酸組成。因此,這也是Bradford和Lowry蛋白質分析的區別。

下面的inforaphic提供了更多關於Bradford和Lowry蛋白質分析之間差異的細節。

布拉德福德(bradford)和洛瑞蛋白測定(lowry protein assay)的區別

總結 - 布拉德福德(bradford) vs. 洛瑞蛋白測定(lowry protein assay)

分析是一種分析技術,用於表徵樣品的主要功能成分。Bradford和Lowry蛋白質分析是兩種在比色技術下起作用的蛋白質分析方法。Bradford和Lowry蛋白質分析都可以確定溶液中的蛋白質濃度。然而,Bradford和Lowry蛋白質分析的關鍵區別在於它們使用的比色技術。Bradford蛋白質分析使用考馬斯亮藍G-250,而Lowry蛋白質分析使用銅離子(Cu+)離子和Folin–Ciocalteu試劑。此外,Bradford法比Lowry蛋白分析法的結果更快。然而,這兩種方法都是高度敏感的方法,受到各種物質的干擾。

引用

1《加拿大植物學雜誌》。《加拿大植物學雜誌》-60(7):1046-PDF,可在這裡獲得。“蛋白質分析化學”,美國賽默飛世爾科技有限公司,可在這裡獲取。
2“蛋白質分析化學”,美國賽默飛世爾科技公司,

  • 發表於 2020-10-21 17:44
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