直接的(direct)和间接elisa(indirect elisa)的区别

酶联免疫分析(ELISA)也称为酶免疫分析,是一种检测血液中抗体的血清学检测方法。它被用作一种诊断工具,用来查明病人是否接触过某种特定类型的病毒或另一种传染源(抗原),以及身体是否产生了抗感染的抗体。酶联免疫吸附法还可以鉴别过去和现在的感染情况。因此,在深入分析疾病之前,ELISA常被医生用作预筛选试验。这个测试可以在实验室里通过从病人身上采集血样来进行。酶联免疫吸附试验有两种:直接ELISA和间...

直接的(direct)和间接elisa(indirect elisa)的区别

酶联免疫分析(ELISA)也称为酶免疫分析,是一种检测血液中抗体的血清学检测方法。它被用作一种诊断工具,用来查明病人是否接触过某种特定类型的病毒或另一种传染源(抗原),以及身体是否产生了抗感染的抗体。酶联免疫吸附法还可以鉴别过去和现在的感染情况。因此,在深入分析疾病之前,ELISA常被医生用作预筛选试验。这个测试可以在实验室里通过从病人身上采集血样来进行。酶联免疫吸附试验有两种:直接ELISA和间接ELISA。直接ELISA和间接ELISA的关键区别在于,间接ELISA更敏感,需要添加一个二级抗体,而直接ELISA则不那么敏感,只使用一个一级抗体。

内容1。概述和主要区别2。什么是直接ELISA3。什么是间接ELISA。并列比较——直接与间接ELISA 5。摘要

什么是直接elisa法(direct elisa)?

ELISA是一种疾病诊断试验,用于确定血液中是否存在特定抗原或抗体。这是一种平板试验。它使用抗体与容易检测的酶相连接。抗原在血清样本中的存在与酶结合的特**抗体结合。在最后一步,加入一个特定的底物与酶反应。这种酶将底物转化为一种有色或信号产生的产物。化学底物的颜色变化表明血清样本中存在特定抗体。直接酶联免疫吸附试验仅使用与酶连接的一级抗体。一旦与抗原结合,它会迅速改变颜色,表明血液中存在感染**原体。然而,在直接ELISA中,由于抗原表位仅限于抗原结合,信号强度较弱。因此,与间接ELISA相比,直接ELISA的敏感性较低。

直接的(direct)和间接elisa(indirect elisa)的区别

图01:直接酶联免疫吸附试验

什么是间接elisa(indirect elisa)?

ELISA可以用两种抗体进行,即一级抗体和二级抗体。间接ELISA工具使用这两种抗体来放大信号,以便更好地检测。间接ELISA技术如下。

  1. 培养板与抗原一起孵育,然后清洗以阻止非特**结合。
  2. 然后加入初级抗体并洗涤。
  3. 加入酶联二级抗体并洗涤。
  4. 添加一种底物,使其与酶发生反应。
  5. 或是在样本中检测到抗原的存在,或是特**的。

在间接ELISA试验中,多个次级抗体可与单一的一级抗体结合。次级抗体与容易检测的酶有关。因此,一个结合可以产生一个强大的信号,因为不止一个相互作用。因此,间接ELISA比直接ELISA更敏感。然而,间接ELISA法由于二次抗体的交叉反应而产生非特****。

图02:间接ELISA试验

直接的(direct)和间接elisa(indirect elisa)的区别

直接ELISA法与间接ELISA法
与间接ELISA相比,直接ELISA的敏感性较低。 间接ELISA法更敏感。
花费的时间
直接ELISA检测是一个快速的过程。 间接ELISA法耗时较长。
抗体的使用
直接ELISA只使用一种抗体(原抗体)。 一级和二级抗体用于间接ELISA。
与酶有关
初级抗体与酶有关。 次级抗体与酶有关。
第二抗体的交叉反应性
直接ELISA消除了第二抗体的交叉反应性。 间接ELISA受第二抗体交叉反应的影响。
信号
与间接ELISA相比,信号较弱。 间接ELISA法扩增信号。因此,很容易检测到。

总结 - 直接的(direct) vs. 间接elisa(indirect elisa)

酶联免疫吸附试验是一种生化技术,主要用于免疫学检测病人血液样本中是否存在抗体或抗原。它可以通过两种被称为直接或间接ELISA的过程来进行。直接ELISA试验只使用一级抗体来检测抗原,而间接ELISA则同时使用一级和二级抗体。在直接ELISA中,主要抗体被标记,而在间接ELISA中,次要抗体被标记。这就是直接ELISA和间接ELISA的区别。

参考文献1.“酶联免疫吸附试验(ELISA)”,《世界卫生组织公报》。U、 美国国家医学图书馆,1976年。网状物。2017年3月29日。Loon,A.M van,J.T van Der Logt,F.W.Heessen和J.van Der Veen。“使用标记抗原检测弓形虫病中免疫球蛋白M和A抗体的酶联免疫吸附试验:与间接免疫荧光法和双夹心酶联免疫吸附法的比较”,《临床微生物学杂志》。U、 美国国家医学图书馆,1983年6月。网状物。2017年3月29日

Image Courtesy:
1. “ELISA diagram” By Cavitri – Own work (CC BY 3.0) via Comm*** Wikimedia 
2. “Indirect ELISA” By Cawang – Own work (CC0) via Comm*** Wikimedia

  • 发表于 2020-10-25 22:46
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