5种常见染料,用于显示和染色dna

溴化乙锭可能是最著名的用于DNA可视化的染料。它可用于凝胶混合物、电泳缓冲液,或在凝胶运行后染色。...

溴化乙锭

溴化乙锭可能是最著名的用于DNA可视化的染料。它可用于凝胶混合物、电泳缓冲液,或在凝胶运行后染色。

染料分子粘附在DNA链上,在紫外光下发出荧光,准确地显示凝胶中的条带位置。尽管溴化乙锭有其优点,但缺点是溴化乙锭是一种潜在的致癌物,因此必须小心处理。

Scientist holding up a DNA sample with results on the computer screen

sybr金

SYBR金染料可用于双链或单链DNA染色​ 或者对RNA进行染色。SYBR黄金作为溴化乙锭的首批替代品之一进入市场,被认为更加敏感。

一旦染料与核酸结合,它的紫外荧光增强能力将提高1000倍。然后,它穿透厚的高百分比琼脂糖凝胶,可用于甲醛凝胶。​

因为未结合分子的荧光很低,所以不需要去染色。许可证持有人分子探针还(自SYBR Gold推出以来)开发并销售了SYBR Safe和SYBR Green,这是溴化乙锭的更安全替代品。

双链嵌合荧光染色

SYBR Green I和II染色剂(同样由分子探针销售)针对不同目的进行了优化。由于它们与DNA结合,因此仍被认为是潜在的诱变剂,因此,应小心处理。

SYBR Green I对双链DNA更敏感,而SYBR Green II则最适合于单链DNA或RNA。像流行的溴化乙锭染色剂一样,这些高度敏感的染色剂在紫外线下发出荧光。

制造商建议将SYBR Green I和II与“254 nm epi照明宝丽来667黑白胶片和SYBR Green gel染色摄影滤光片”一起使用,以实现每个带100 pg RNA或单链DNA的检测。

安全的

SYBR Safe被设计成比溴化乙锭和其他SYBR着色剂更安全的替代品。它不被视为危险废物,通常可以通过常规下水道系统(即下水道)进行处理,因为毒性测试表明没有急性毒性。

试验还表明,叙利亚仓鼠胚胎(SHE)细胞、人类淋巴细胞、小鼠淋巴瘤细胞或AMES试验中发现的细胞几乎没有遗传毒性。这种着色剂可以与蓝光透射器一起使用,它对被观察的DNA造成的损伤较小,为以后的克隆提供了更好的效率。​

伊娃·格林

Eva绿是一种绿色荧光染料,已发现其抑制聚合酶链反应(PCR)的程度低于其他染料。这使得它对于定量实时PCR等应用非常有用。

如果你使用低熔点凝胶来回收DNA,这也是一个很好的选择。它在高温下非常稳定,自身荧光非常低,但与DNA结合时荧光强度很高。Eva绿也被证明具有非常低或没有细胞毒性或致突变性。

  • 发表于 2021-09-10 01:44
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  • 分类:科学

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