TBE缓冲液（三硼酸EDTA）是由三硼酸、硼酸和EDTA（乙二胺四乙酸）组成的缓冲溶液。该缓冲液通常用于琼脂糖凝胶电泳，用于分析PCR扩增、DNA纯化协议或DNA克隆实验产生的DNA产物。

tbe使用

TBE缓冲液特别适用于分离较小的DNA片段（分子量<1000），例如限制性内切酶消化的小产物。TBE具有更大的缓冲容量，并将提供比TAE缓冲更清晰的分辨率。TAE（三醋酸盐EDTA）缓冲液是由三醋酸盐、乙酸和EDTA组成的溶液。

TBE通常比TAE更昂贵，并且抑制DNA连接酶，如果打算进行后续的DNA纯化和连接步骤，可能会导致问题。通过下面的三个简单步骤，学习如何制作TBE缓冲区。创建它不应该超过30分钟。

你需要什么

要制作缓冲液，你只需要四种物质。此列表上的其余项目为设备。所需的四种物质是EDTA二钠盐、三联碱、硼酸和去离子水。

至于设备，你需要一个pH计和校准标准，视情况而定。此外，您还需要600毫升和1500毫升的烧杯或烧瓶。四舍五入你的设备需要量筒，搅拌棒和搅拌板。

检查​在开始之前，你将使用实验室的库存来确保你拥有所需的一切。没有什么比停下来准备解决方案更糟糕的了，因为你已经用完了合适的材料。

如果你的实验室在学校或工地，请与相关人员联系，确保他们有库存中的所有物品。这样做最终可能会节省你的时间和精力。

公式重量缩写为FW。它是一种元素的原子量乘以公式中每种元素的原子数，然后将每种元素的所有质量相加。

edta储备液

应提前准备EDTA溶液。在pH值调整到8.0左右之前，EDTA不会完全进入溶液。对于含有0.5 M EDTA的500毫升储备溶液，称取93.05克EDTA二钠盐（FW=372.2）。然后将其溶解在400毫升去离子水中，并用NaOH（氢氧化钠）调节pH值。之后，将溶液加满至最终体积为500毫升。

tbe原液

通过称量54克三联碱（FW=121.14）和27.5克硼酸（FW=61.83）并将二者溶解在约900毫升去离子水中，制备浓缩（5倍）的TBE储备溶液。然后添加20毫升0.5 M（摩尔浓度或浓度）EDTA（pH 8.0），并将溶液调节至1升的最终体积。该溶液可在室温下储存，但在旧溶液中会形成沉淀。将缓冲液储存在玻璃瓶中，如果形成沉淀，则丢弃。

tbe的工作方案

对于琼脂糖凝胶电泳，可使用浓度为0.5倍的TBE缓冲液（浓缩原液的1:10稀释度）。将储备溶液在去离子水中稀释10倍。最终溶质浓度为45 mM三硼酸酯和1 mM（毫摩尔）EDTA。缓冲液现在可用于运行琼脂糖凝胶。