ELISA程序从临床开始,从患者身上采集血样。然后在实验室中使用ELISA检测试剂盒执行许多步骤。该测试将检测血液中是否存在针对某种疾病(如HIV)的抗体或抗原。这些步骤包括添加各种物质和清洗,通常通过颜色变化来测量结果。
酶联免疫吸附试验(ELISA),也称为酶免疫分析(EIA),用作诊断试验。这是众所周知的HIV诊断测试。测试板通常由96个小孔组成,其中固定有特定抗原。如果抗体存在于血清样本中,它将与抗原结合,允许通过ELISA程序的各个步骤进行检测。
ELISA程序的第一步是从患者身上获取样本。这是由护士在无菌条件下完成的。血液通常取自手臂或手部的静脉。在手臂上放置止血带,使静脉膨胀,使手术更容易,并在将插入针头的地方清洁皮肤。当针头插入时,可能会感觉到一个小刺痛,血液将被收集到无菌管中。
采集血样后,将其转移到实验室,由实验室技术人员执行剩余的ELISA程序。首先将血样添加到ELISA板的孔中。如果存在特异性抗体,它会与抗原结合。然后使用缓冲液清洗培养皿,以去除未结合的抗体。
然后加入第二种抗体,通常为动物源性抗体,该抗体上附着有一种酶,该酶将与抗体-抗原复合物结合。再次清洗盘子,以去除多余的水分。当在ELISA程序结束时添加底物时,酶呈颜色反应。给出结果的是颜色变化程度的测量。
需要仔细遵循ELISA程序,以避免错误结果。在大多数ELISA板中,包括阳性和阴性对照,以尽量减少此类假结果。当检测艾滋病毒时,阳性结果通常会随后进行第二次确认性检测,通常是不同类型的检测,如westernblot。
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