重组克隆通常指的是重组DNA技术。这涉及到将不会自然存在的DNA序列结合起来。这些技术有时也被称为基因工程。DNA的特定片段被分离出来,并结合在一个较小的DNA单元中,该单元将复制和扩增克隆的DNA分子数量。
重组克隆的宿主生物体通常是细菌。用于克隆的DNA载体被称为载体,通常是病毒或质粒--细菌染色体外的圆形DNA片段。用于克隆的质粒将有一个复制原点,以便它能自我复制,还有一个克隆点和某种可选择的标记,如抗生素抗性。这将确保对含有克隆的细胞进行选择和繁殖。
克隆点有一个专门的序列,将被一种特定的限制性核酸内切酶识别--一种识别特定DNA序列并切割核苷酸的酶。质粒将首先被切割,使其呈线性。研究人员一般尝试使用留下重叠的 "粘性末端 "的限制性内切酶,并将使用连接酶将目标基因的末端与载体中的兼容序列进行退火,从而将其恢复成一个圆。一旦基因被克隆到载体中,该载体就被引入其表达宿主,通常是通过一个被称为转化的过程,并大量生长。然后,DNA可以被分离出来并用于实验。
重组克隆允许分析通常只在细胞中短暂表达的大量分子,如mRNAs和蛋白质。这彻底改变了生物学的研究。重组克隆有许多实际应用。
诸如人类生长激素之类的蛋白质可以通过重组克隆大量表达。转基因植物正被用于农业,以防止昆虫和病原体的攻击。许多食物已经被转基因以改善它们,奶牛已经被用重组克隆生产的牛生长激素处理,以增加牛奶产量。基因疗法已被用于许多治疗方法,包括治疗一种失明症。动物甚至正在被克隆,尽管克隆体经常出现健康问题。
重组克隆的一些用途是非常有争议的。许多人反对吃转基因食品或喝含有重组荷尔蒙的牛奶。人们非常担心,经过基因改造的作物可能会将其新基因传播到当地的植物群中。
有些人在哲学上反对改变现有的生命形式。人们对克隆人的想法几乎普遍表示谴责。这些新技术是否会充分发挥其实际潜力,或者社会是否会限制其使用,还有待观察。
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