如何进行连续稀释(do serial dilutions)

化学中的稀释是降低溶液中物质浓度的过程。连续稀释是指溶液的重复稀释,以快速放大稀释系数。它通常在需要高度稀释溶液的实验中进行,例如涉及对数刻度浓度曲线的实验,或者在测定细菌密度时进行。系列稀释液广泛用于生物化学、微生物学、药理学和物理学等实验科学。...

方法1方法1/2:进行基本稀释

  1. 1确定合适的稀释液。稀释物质的液体非常重要。许多溶液会在蒸馏水中稀释,但情况并非总是如此。如果要稀释细菌或其他细胞,可能需要在培养基中稀释。您选择的液体将用于每次连续稀释。如果你不确定使用什么液体,请寻求帮助或在线查看其他人是否进行过类似的稀释。
  2. Image titled Do Serial Dilutions Step 1
  3. 2用9毫升稀释液准备几根试管。这些试管将用作稀释空白。将未稀释的样品添加到第一个试管中,然后连续稀释到以下试管中。在开始之前给所有试管贴上标签是很有帮助的,这样一旦开始稀释,你就不会感到困惑。从未稀释的试管开始,每根试管将稀释10倍。第一根试管的稀释度为1:10,第二根试管的稀释度为1:100,第三根试管的稀释度为1:1000,以此类推。事先确定需要进行的稀释次数,以免浪费试管或稀释液体。
  4. Image titled Do Serial Dilutions Step 2
  5. 3用至少2毫升的未稀释溶液制备试管。进行该系列稀释所需的最小量为1毫升未稀释溶液。如果只有1毫升,则不会有任何剩余的未稀释溶液。给这根试管贴上未稀释溶液的标签。在开始任何稀释之前,彻底混合溶液。
  6. Image titled Do Serial Dilutions Step 3
  7. 4进行第一次稀释。用移液管从试管中吸取1毫升未稀释溶液,并将其转移到标有1:10的试管中,试管中含有9毫升稀释液,并充分混合。9毫升稀释液中现在有1毫升未稀释溶液。因此,溶液被稀释了10倍。
  8. Image titled Do Serial Dilutions Step 4
  9. 5进行第二次稀释。对于第二次连续稀释,从1:10试管中取出1毫升溶液,并将其添加到1:100试管中的9毫升稀释液中。在加入下一管之前,将管1:10充分混合。稀释后,再次将试管按1:100的比例混合。将试管1:10中的溶液稀释10倍至试管1:100。
  10. Image titled Do Serial Dilutions Step 5
  11. 6扩展此程序以进行更长时间的连续稀释。该过程可根据需要重复多次,以获得所需的解决方案。在涉及浓度曲线的实验中,可以使用连续稀释创建一系列稀释度为1、1:10、1:100、1:1000的溶液。
  12. Image titled Do Serial Dilutions Step 6

方法2方法2/2:计算最终稀释系数和浓度

  1. 1计算连续稀释中的最终稀释比。总稀释率可通过乘以最终步骤前每个步骤的稀释系数来确定。这可以用公式Dt=D1 x D2 x D3 x…x Dn进行数学说明,其中Dt是总稀释系数,Dn是稀释比。例如,假设你用1:10的比例将液体稀释4次。将稀释系数代入公式:Dt=10 x 10 x 10 x 10=10000连续稀释中第四根试管的最终稀释系数为1:10000。你的物质浓度现在是原来未稀释溶液的10000倍。
  2. Image titled Do Serial Dilutions Step 7
  3. 2稀释后测定溶液浓度。为了确定连续稀释后溶液的最终浓度,您需要知道初始浓度。方程式为Cfinal=Cinitial/D,其中Cfinal是稀释溶液的最终浓度,Cinitial是原始溶液的起始浓度,D是之前确定的稀释比。例如:如果你从浓度为1000000个细胞/mL的细胞溶液开始,稀释率为1000,那么你的稀释样品的最终浓度是多少?使用以下等式:Cfinal=Cinitial/DCfinal=1000000/1000Cfinal=1000个细胞/mL。
  4. Image titled Do Serial Dilutions Step 8
  5. 3确认所有单元匹配。在执行任何计算时,都要确保单位始终匹配。如果以每毫升细胞数开始,确保以每毫升细胞数结束。如果开始浓度为百万分之几(ppm),则最终浓度必须为ppm。
  6. Image titled Do Serial Dilutions Step 9
  • 发表于 2022-03-23 05:43
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  • 分类:教育

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