什么是聚合酶链反应？(a polymerase chain reaction?)
聚合酶链反应（PCR）使用酶大规模复制脱氧核糖核酸（DNA）链的一部分，以便于分析，例如寻找感兴趣的基因。与核链式反应一样，聚合酶链式反应是一个指数过程，只要维持反应的原材料可用，它就会继续进行。与自然界中的DNA复制不同，PCR只能复制相当小的DNA片段，上限约为2-3千碱基对（kb）。它使用无生命的酶来实现其复制效果，使其与其他使用活性生物体的复制方法不同。。
现代聚合酶链反应需要六个基本组成部分才能工作：要复制的DNA片段、界定片段的引物、进行复制的Taq聚合酶、用作原料的DNA核苷酸、化学缓冲环境和一台称为热循环器的机器。热循环器通常容纳多个带有多个PCR的试管，每个试管容纳15至100微升，数值略低于一立方毫米水。使用了大约100纳克的DNA碱基。
Taq聚合酶是聚合酶链反应的关键成分，从深海热喷口细菌Thermus aquaticus中提取。它可以很好地进行复制，但并不完美，大约每800万个碱基对就会产生一次错误。在Taq聚合酶出现之前，还使用过其他聚合酶，但其中许多酶在反应开始所需的温度下分解。加热循环很复杂，但包括几乎一直到沸点的温度，因此聚合酶的耐久性至关重要。。
PCR的基本步骤如下。所有成分在一个小瓶中混合，通常体积为200微克。这种混合物被加热到接近沸点，以破坏成对的DNA链中的氢键，产生易于复制的单链。这叫做变性。复制的链越长，变性过程持续的时间就越长。
聚合酶链反应的下一步叫做退火。这些引物是定制的短DNA链，专门设计用于连接待复制片段起始和末端的位点。如果引物设计不正确或这一阶段的温度错误，引物将随机结合到DNA上，导致错误的片段复制。大多数底漆的熔点约为沸点的三分之二，退火需要1-2分钟，温度低于沸点几度。。
PCR的最后一步称为延伸和最终延伸。这就是魔法发生的地方。聚合酶快速复制DNA片段，在短短几分钟内创造出数百万份拷贝。通常，一个循环包括所有之前的步骤，重复大约二十或三十次。
结果是一堆复制的DNA。聚合酶链反应有多种用途，包括亲子鉴定、确定是否存在遗传缺陷或病毒DNA、克隆基因、引入特定突变、分析灭绝物种或死者的DNA、“犯罪现场的基因指纹”等等。
- 发表于 2022-02-08 19:37
- 阅读 ( 91 )
- 分类：科学
你可能感兴趣的文章
一致性pcr(consensus pcr)和泛聚合酶链反应(pan pcr)的区别
...每种PCR类型使用的引物靶点。 目录 1. 概述和主要区别 2. 什么是共识PCR 3. 什么是Pan-PCR 4. 一致PCR与Pan-PCR的相似性 5. 并排比较-以表格形式进行共识PCR和Pan PCR 6. 摘要 什么是一致性pcr(c***ensus pcr)？ 一致PCR是一种针对特定物种或属...
受约束的(controlled)和不受控制的连锁反应(uncontrolled chain reaction)的区别
...受控链式反应 5. 摘要 什么是受控链式反应(controlled chain reaction)？ 受控链式反应是在受控条件下随后发生的一系列核反应。让我们以核裂变反应为例来理解这个概念。当中子和可裂变同位素相互作用时，就会发生裂变连锁反应。...
普希(phusion)和Taq聚合酶(taq polymerase)的区别
...代替Phusion聚合酶来解决这个问题。 什么是Taq聚合酶(taq polymerase)？ taqdna聚合酶的发明彻底改变了分子生物学领域。它解决了DNA扩增的一个主要问题。taqdna聚合酶是从嗜热菌Thermus aquaticus中提取和分离的一种热稳定的聚合酶酶。这...
rna聚合酶ⅠⅡ(rna polymerase i ii)和三(iii)的区别
...合酶I、II和III的表格形式 7. 摘要 什么是rna聚合酶Ⅰ(rna polymerase i)？ 在真核生物中发现了一种高级RNA聚合酶。它催化rRNA分子的转录。RNA poli分子大小为590kda。它由14种不同的多肽（亚单位）组成。 图01:RNA聚合酶I RNA聚合酶I不依...
dna连接酶(dna ligase)和dna聚合酶(dna polymerase)的区别
dna连接酶(dna ligase)和dna聚合酶(dna polymerase)的区别 DNA连接酶和DNA聚合酶是参与生物体DNA复制和DNA修复机制的重要酶。DNA连接酶通过催化核苷酸间磷酸二酯键的形成来连接DN**段。DNA聚合酶负责使用模板DNA从其构建块（核苷酸）...
dna聚合酶12(dna polymerase 1 2)和三(3)的区别
dna聚合酶1(dna polymerase 1)和2(2)的区别 DNA聚合酶是参与生物体DNA复制的一类特殊酶。由于这种酶的存在，遗传信息从一代传给下一代。在真核生物和原核生物中有不同形式的DNA聚合酶酶。DNA聚合酶1、2和3只存在于原核生物中，...
Taq聚合酶(taq polymerase)和dna聚合酶(dna polymerase)的区别
Taq聚合酶(taq polymerase)和dna聚合酶(dna polymerase)的区别 DNA聚合酶是一种酶，它能从其组成部分（核苷酸）中产生新的DNA。在原核生物和真核生物中，发现了不同类型的DNA聚合酶。由于这些特殊酶的存在，DNA复制是可行的，遗传...
聚合酶链反应(pcr)和逆转录聚合酶链反应(rt pcr)的区别
...RT PCR的区别是什么–关键区别的比较 Key Terms: PCR, RT-PCR, Polymerase Chain Reaction, Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction, DNA Template, DNA Polymerase, Denaturation, Annealing, Primer Extension 什么是聚合酶链反应(pcr)？ PCR（Polymerase Chain Reaction）是一...
dna聚合酶1(dna polymerase 1)和三(3)的区别
主要差异dna聚合酶1(main difference dna polymerase 1) vs. 三(3) DNA聚合酶1和3是参与原核DNA复制的两种DNA聚合酶。DNA聚合酶通过将核苷酸组装到父链上，有助于合成新的DNA链。DNA聚合酶1和3在5'到3'方向上都具有复制活性。DNA聚合酶...
聚酰胺(polyamide)和聚酰亚胺(polyimide)的区别
...的每个单体都应该有两个官能团才能发生聚合。 Figure 1: Reaction between Carbonyl Group and Amine Group 这两个基团之间的反应在碳原子和氮原子之间形成键。这是通过羰基中的羟基和胺基中的氢原子的消除来实现的。因此，这种聚合反应...
0 篇文章
