什么是聚合酶链反应（pcr）？(polymerase chain reaction (pcr)?)
PCR代表聚合酶链反应，这是一种在受控条件下使用DNA聚合酶生成多个拷贝来扩增DNA片段的分子生物学技术。只要一个DNA片段或基因的一个拷贝就可以被克隆成数百万个拷贝，从而可以使用染料和其他可视化技术进行检测。
1983年发展起来的PCR过程使进行DNA测序和确定单个基因中核苷酸的顺序成为可能。该方法使用热循环或重复加热和冷却反应进行DNA熔化和复制。随着PCR的继续，“新”DNA被用作复制的模板，随后发生链式反应，以指数方式扩增DNA模板。
PCR技术应用于生物技术的许多领域，包括蛋白质工程、克隆、法医学（DNA指纹）、亲子鉴定、遗传和/或传染病诊断以及环境样本分析。
特别是在法医学中，PCR特别有用，因为它甚至可以放大最小数量的DNA证据。PCR还可以用来分析数千年前的DNA，这些技术已经被用于识别世界各地的一切，从一头80万年前的猛犸到木乃伊。
pcr程序
初始化
此步骤仅对需要热启动PCR的DNA聚合酶是必需的。将反应加热至94至96℃并保持1-9分钟。
变性
如果该过程不需要初始化，变性是第一步。将反应物加热至94-98°C并持续20-30秒。DNA模板的氢键被破坏，产生单链DNA分子。
退火
反应温度降低至50至65°C，并保持20-40秒。引物与单链DNA模板退火。在此步骤中，温度非常重要。如果太热，底漆可能无法粘合。如果天气太冷，底漆可能粘合不完全。当引物序列与模板序列紧密匹配时，形成良好的键合。
延伸/伸长
此步骤中的温度根据聚合酶的类型而变化。DNA聚合酶合成一条全新的DNA链。
最终伸长率
在最终PCR循环后，该步骤在70-74°C下进行5-15分钟。
最终持有
此步骤是可选的。温度保持在4-15°C并使反应进行。
pcr程序的三个阶段
指数放大
在每个周期中，产物（被复制的特定DNA片段）都会加倍。
整平舞台
当DNA聚合酶失去活性并消耗试剂时，反应会减慢。
高原
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- 发表于 2021-10-14 17:59
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- 分类：化学
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