【分子生物学】的知识问答

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dna(dna)和rna提取(rna extraction)的区别

DNA提取和RNA提取的主要区别是DNA提取的pH值为8，RNA提取的pH值为4.7。在酸性条件下，DNA易变性并向有机相迁移。在碱性条件下，由于核糖糖中存在2′OH，RNA发生碱性水解。...

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evener 发布于 2021-06-30 16:20

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什么是分子生物学的中心教条(the central dogma of molecular biology)

分子生物学的中心法则描述了从DNA到RNA到蛋白质的信息流。这种信息流称为基因表达。它主要通过两个过程发生：转录和翻译。转录是包含基因编码序列的RNA分子的合成。翻译是在转录之后进行的，其中一个基因的氨基酸序列是根据mRNA中的编码序列合成的。...

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fv967673 发布于 2021-06-30 14:54

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什么是转录的最终产物(the end product of transcription)

转录的最终产物是RNA分子。因此，在转录过程中，将基因组中的基因信息复制到RNA中。转录产生的RNA主要有mRNA、tRNA和rRNA。此外，转录是蛋白质合成的第一步。在此期间，RNA聚合酶转录基因中的信息，从而产生RNA分子。在蛋白质合成过程中，mRNA将一个基因的信息从细胞核传递到细胞质。另外，另外两种主要的RNA类型有利于翻译。...

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棒棒和冬瓜发布于 2021-06-30 14:51

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如何dna得到放松，保持放松(the dna get unwind and stay unwind)

螺旋酶是双链DNA解绕产生单链DNA的主要原因。它们负责DNA复制、重组和修复过程中的DNA解绕。双链DNA的解绕始于复制的起源，并继续形成一种称为复制叉的结构。两条DNA链之间氢键的断裂需要ATP形式的能量。螺旋酶还捕获未找到的碱基，以防止DNA的再整理。...

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a5043826024 发布于 2021-06-30 14:29

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如何qpcr引物的设计(design primers for qpcr)

定量或实时PCR是检测不同实验条件下基因表达相对变化的常规方法。QPCR过程中引物和探针的设计是影响检测质量和成功率的关键因素之一。QPCR引物的设计有几个原则：引物GC含量应为35-65%；底漆的熔化温度应在60-68℃°C类；还应避免二级结构，Gs或Cs的重复长度超过3碱基，以及引物二聚体的形成。...

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haorrryy 发布于 2021-06-30 14:27

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为什么病毒被用于基因治疗

基因治疗是将外源基因物质导入人体细胞，以补偿异常基因或合成有益蛋白质。有效地将遗传物质转移到靶细胞是达到预期治疗效果的关键。为了促进基因转移，可以使用病毒载体或非病毒载体作为传递系统。病毒是一种广泛使用的载体，可以将外源DNA转移到细胞中。基因转移中最常见的病毒载体有逆转录病毒、腺病毒和腺相关病毒。病毒感染细胞的能力是病毒作为基因治疗载体的关键。...

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gxuorhhifv527 发布于 2021-06-30 14:22

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如何产生的基因组文库(a genomic library produced)

基因组库是包含特定生物体总染色体DNA的两种DNA库之一。在基因组库中，不同的DNA插入物存储在一个相同载体的群体中。为了制备一个特定生物体的基因组库，基因组DNA应该从生物体中分离出来。限制酶在特定的DNA序列中消化基因组DNA，从而产生基因组DNA片段。每个片段可能包含一个或两个基因。这些片段被插入到特定类型的载体中，并转化为宿主细菌，以制备DNA克隆。...

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woq4109 发布于 2021-06-30 14:18

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如何从总rna中分离mrna(isolate mrna from total rna)

oligo-dT/载体组合主要用于通过亲和层析技术从总RNA中纯化mRNA。从总RNA中分离mRNA的方法主要有两种，一种是根据细胞的类型；即直接法和减法。本文对这两种方法进行了说明。...

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冰息I 发布于 2021-06-30 14:13

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如何蛋白质印迹法(western blotting work)

westernblotting是一种分子生物学技术，用于检测样本中的特定蛋白质。它使用SDS-PAGE根据蛋白质的大小来分离蛋白质，然后这些分离的蛋白质被转移到膜中。这项技术使用特定的一级抗体在印迹中标记特定的蛋白质。用报告蛋白标记的二级抗体检测用一级抗体标记的蛋白。...

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jqakkcr516 发布于 2021-06-30 14:12

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如何南方印迹法(southern blotting work)

Southern杂交是一种用于检测样本中特定DNA片段的技术。印迹技术涉及通过凝胶电泳根据大小分离DNA片段，将大小分级的DNA样品转移到滤膜上，用标记的序列特异性探针杂交特定的DNA片段，并检测标记的条带。...

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xjcn0170 发布于 2021-06-30 14:10

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如何读质粒图谱(read a plasmid map)

质粒图谱是质粒中元素的相对位置。通过了解质粒的特征可以阅读质粒图谱。它们是质粒的名称和大小，质粒的元素，它们的相对位置，以及启动子的方向。复制起源（ORI）、耐药基因、多克隆位点（MCS）、目的基因、启动子区、选择标记和引物结合位点是质粒的组成部分。质粒中元素的相对位置可以通过定位质粒来确定。质粒定位的过程称为限制性定位。...

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Recallchen 发布于 2021-06-30 14:09

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如何计算转染效率(calculate transfection efficiency)

转染效率可以通过计算特定样本中转染细胞总数来计算。细胞的数量可以用两种方法来计算。最常用的方法是使用易于处理的记者。这些报告物可以是绿色荧光蛋白（GFP）、荧光素酶、β-半乳糖苷酶、分泌型碱性磷酸酶（SEAP）。最新的计算转染效率的方法是标记核酸，从而跟踪它们在细胞内的传递。其他一些方法如westernblotting、免疫染色和功能分析也可以用来计算转染效率。由于转染效率取决于多个实验参数，因此...

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vfgj9471 发布于 2021-06-30 14:07

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如何dna测序工作(dna sequencing work)

测序是测定特定DNA片段核苷酸序列所涉及的过程。测序过程中，用荧光标记核苷酸对DNA片段进行PCR标记。这一过程使用四种荧光标记核苷酸，它们是二氧基核苷酸（ddNTPs）。ddNTPs缺乏一个3′OH基团，其中磷酸群的传入核苷酸是连接。因此，当ddNTP加入生长链时，链的3′端不再添加核苷酸。这意味着在增长链中添加ddNTP终止了链增长。由于ddNTPs以低浓度加入PCR混合物中，因此每个生长链在...

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o486899 发布于 2021-06-30 14:05

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如何制备稳定的转染细胞系(make stable transfected cell line)

稳定转染是将外源DNA长期导入细胞的过程。稳定转染的细胞通过子代传递外源DNA。因此，要获得稳定转染的细胞系，必须将外源DNA整合到细胞系的基因组中。然而，在非基因组DNA中也可以观察到稳定的遗传。一个成功的、稳定的转染需要有效的DNA递送方法以及在细胞系中对外源DNA的选择方法。稳定转染的细胞系被广泛应用于重组蛋白的生产、基因功能研究、药物发现分析等。...

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云客来交流-骑骑发布于 2021-06-30 14:05

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如何illumina测序工作(illumina sequencing work)

Illumina测序是下一代测序方法，又称“合成测序法”。Illumina测序涉及并行处理数百万个片段。Illumina测序工作流程涉及的四个基本步骤是库准备、聚类生成、测序和数据分析，本文将对此进行进一步描述。...

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nvlbr720628 发布于 2021-06-30 14:04

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