主要區別
基因克隆與PCR的主要區別在於,基因克隆是一種透過形成重組DNA(rDNA)在體內產生所需的DNA或基因的技術,而PCR是一種透過反覆的鏈分離和聚合迴圈進行DNA擴增的技術。
基因克隆(gene cloning) vs. pcr(pcr)
從一個期望的DNA中形成多個複製稱為DNA增殖或DNA擴增。通常有兩種方法用於擴增DNA,即基因克隆和PCR或聚合酶鏈反應。這兩種生物技術產品在瞭解疾病方面起著重要作用。透過這些分子技術,科學家可以複製出越來越多的所需DNA。基因克隆是一種透過形成rDNA(重組DNA,一種攜帶多種來源遺傳物質的DNA分子)在體內(生物體內)獲得所需DNA或感興趣基因的技術。另一方面,聚合酶鏈反應(PCR)是一種不使用rDNA的重複分離和聚合迴圈,在試管中(而不是在活生物體中)擴增DNA的技術。基因克隆需要大量的DNA進行擴增,即至少需要一微克的DNA,而在PCR中,只有一納克的DNA就足以進行擴增。此外,基因克隆還需要細菌細胞、DNA連線酶、載體DNA和限制性酶。另一方面,在PCR技術中需要一個熱穩定的DNA聚合酶、DNA核苷酸和RNA引物以及DN**段。基因克隆是一個勞動密集型的過程,出錯的可能性較大,而PCR不需要密集勞動,出錯的可能性也較小。
比較圖
什麼是基因克隆(gene cloning)?
基因克隆是透過形成重組DNA(rDNA)在體內獲得所需基因或部分DNA的多個複製的過程。19世紀,漢斯·德里斯是第一個透過分裂海膽胚胎克隆動物的人。為了透過基因克隆來擴增DNA,首先從含有生物體所有基因的生物體中分離出DNA。然後用限制性酶將所需的基因切割成合適的大小。同樣的限制性酶用於切割質粒或載體DNA(一種自我複製的載體分子)。然後將所需的基因或DNA與質粒混合。質粒和所需的DNA在DNA連線酶的作用下相互連線。這個重組質粒然後透過一個被稱為轉化的過程***到細菌中。這種細菌然後一次又一次地繁殖,並在複製質粒的同時形成所需DNA的多個複製。
什麼是pcr(pcr)?
PCR是“聚合酶鏈反應”的意思,是一種迴圈的體外反應,也用於擴增DNA。Kary Mullis是第一個在1983年發明PCR技術並於1993年獲得諾貝爾獎的人。聚合酶鏈反應需要一種耐熱的DNA聚合酶,例如Taq聚合酶,因為在這個過程中溫度不斷變化。此外,還需要根據所需的DN**段和遊離DNA核苷酸設計RNA引物。在所有這些物質的存在下,迴圈聚合酶反應一次又一次地重複,在體外(在實驗室的試管中)形成所需DNA的多個副本。
主要區別
- 一種DNA擴增技術,透過形成rDNA(重組DNA)並將其匯入細菌,可以在體內獲得所需的DNA,這種技術被稱為基因克隆,一種DNA擴增技術,其中所需的DNA可以透過重複的支架分離和聚合迴圈在體外獲得,稱為PCR或聚合酶鏈反應。
- 在19世紀,漢斯·德里斯是第一個克隆動物的人;另一方面,1983年,卡里·穆利斯發明了PCR技術。
- 重組DNA用於基因克隆。相反,PCR不需要rDNA。
- 在基因克隆中,擴增需要更多的DNA,即至少需要一微克的DNA,而在PCR中,只有一納克的DNA就足以進行擴增。
- 基因克隆需要細菌細胞、DNA連線酶、載體DNA和限制性酶。另一方面,在PCR技術中需要一個熱穩定的DNA聚合酶、DNA核苷酸、RNA引物和DN**段。
- 在基因克隆中,擴增出的DNA需要在最後一步進行篩選才能得到所需的DNA,而如果DNA在反應開始前是純的,那麼PCR就不需要進行篩選。
- 基因克隆一個實驗需要2到4天;另一方面,4個小時對於PCR實驗來說已經足夠了。
- 基因克隆不需要自動化,而在PCR中自動化是必須的。
- 基因克隆是一個勞動密集型的過程,而PCR不需要密集的勞動。
- 基因克隆出錯的可能性更大,而PCR則更不可能出錯。
- 透過基因克隆擴增出的DNA用途有限,而PCR擴增的DNA由於出錯的可能性較小,可用於多種用途。
結論
以上討論總結了基因克隆和PCR都是擴增DNA的重要技術。基因克隆是一個在體內(發生在生物體內)耗時較長的過程,而PCR是一個在體外(在實驗室內的試管中)進行的快速過程,出錯的可能性較小。