主要区别
基因克隆与PCR的主要区别在于,基因克隆是一种通过形成重组DNA(rDNA)在体内产生所需的DNA或基因的技术,而PCR是一种通过反复的链分离和聚合循环进行DNA扩增的技术。
基因克隆(gene cloning) vs. pcr(pcr)
从一个期望的DNA中形成多个拷贝称为DNA增殖或DNA扩增。通常有两种方法用于扩增DNA,即基因克隆和PCR或聚合酶链反应。这两种生物技术产品在了解疾病方面起着重要作用。通过这些分子技术,科学家可以复制出越来越多的所需DNA。基因克隆是一种通过形成rDNA(重组DNA,一种携带多种来源遗传物质的DNA分子)在体内(生物体内)获得所需DNA或感兴趣基因的技术。另一方面,聚合酶链反应(PCR)是一种不使用rDNA的重复分离和聚合循环,在试管中(而不是在活生物体中)扩增DNA的技术。基因克隆需要大量的DNA进行扩增,即至少需要一微克的DNA,而在PCR中,只有一纳克的DNA就足以进行扩增。此外,基因克隆还需要细菌细胞、DNA连接酶、载体DNA和限制性酶。另一方面,在PCR技术中需要一个热稳定的DNA聚合酶、DNA核苷酸和RNA引物以及DN**段。基因克隆是一个劳动密集型的过程,出错的可能性较大,而PCR不需要密集劳动,出错的可能性也较小。
比较图
什么是基因克隆(gene cloning)?
基因克隆是通过形成重组DNA(rDNA)在体内获得所需基因或部分DNA的多个拷贝的过程。19世纪,汉斯·德里斯是第一个通过分裂海胆胚胎克隆动物的人。为了通过基因克隆来扩增DNA,首先从含有生物体所有基因的生物体中分离出DNA。然后用限制性酶将所需的基因切割成合适的大小。同样的限制性酶用于切割质粒或载体DNA(一种自我复制的载体分子)。然后将所需的基因或DNA与质粒混合。质粒和所需的DNA在DNA连接酶的作用下相互连接。这个重组质粒然后通过一个被称为转化的过程***到细菌中。这种细菌然后一次又一次地繁殖,并在复制质粒的同时形成所需DNA的多个拷贝。
什么是pcr(pcr)?
PCR是“聚合酶链反应”的意思,是一种循环的体外反应,也用于扩增DNA。Kary Mullis是第一个在1983年发明PCR技术并于1993年获得诺贝尔奖的人。聚合酶链反应需要一种耐热的DNA聚合酶,例如Taq聚合酶,因为在这个过程中温度不断变化。此外,还需要根据所需的DN**段和游离DNA核苷酸设计RNA引物。在所有这些物质的存在下,循环聚合酶反应一次又一次地重复,在体外(在实验室的试管中)形成所需DNA的多个副本。
主要区别
- 一种DNA扩增技术,通过形成rDNA(重组DNA)并将其导入细菌,可以在体内获得所需的DNA,这种技术被称为基因克隆,一种DNA扩增技术,其中所需的DNA可以通过重复的支架分离和聚合循环在体外获得,称为PCR或聚合酶链反应。
- 在19世纪,汉斯·德里斯是第一个克隆动物的人;另一方面,1983年,卡里·穆利斯发明了PCR技术。
- 重组DNA用于基因克隆。相反,PCR不需要rDNA。
- 在基因克隆中,扩增需要更多的DNA,即至少需要一微克的DNA,而在PCR中,只有一纳克的DNA就足以进行扩增。
- 基因克隆需要细菌细胞、DNA连接酶、载体DNA和限制性酶。另一方面,在PCR技术中需要一个热稳定的DNA聚合酶、DNA核苷酸、RNA引物和DN**段。
- 在基因克隆中,扩增出的DNA需要在最后一步进行筛选才能得到所需的DNA,而如果DNA在反应开始前是纯的,那么PCR就不需要进行筛选。
- 基因克隆一个实验需要2到4天;另一方面,4个小时对于PCR实验来说已经足够了。
- 基因克隆不需要自动化,而在PCR中自动化是必须的。
- 基因克隆是一个劳动密集型的过程,而PCR不需要密集的劳动。
- 基因克隆出错的可能性更大,而PCR则更不可能出错。
- 通过基因克隆扩增出的DNA用途有限,而PCR扩增的DNA由于出错的可能性较小,可用于多种用途。
结论
以上讨论总结了基因克隆和PCR都是扩增DNA的重要技术。基因克隆是一个在体内(发生在生物体内)耗时较长的过程,而PCR是一个在体外(在实验室内的试管中)进行的快速过程,出错的可能性较小。