微阵列(microarray)和rna测序(rna sequencing)的区别

转录组代表存在于细胞中的RNA的全部内容,包括mRNA、rRNA、tRNA、降解RNA和非降解RNA。转录组分析是理解细胞洞察力的一个重要过程。有几种高级的转录组分析方法。微阵列和RNA测序是两种用于分析转录组的技术。微阵列与RNA测序的关键区别在于,微阵列是基于预先设计的标记探针与靶cDNA序列的杂交潜力,而RNA测序是基于通过NGS等先进测序技术对cDNA链的直接测序。微阵列是利用序列的先验知...

微阵列(microarray)和rna测序(rna sequencing)的区别

转录组代表存在于细胞中的RNA的全部内容,包括mRNA、rRNA、tRNA、降解RNA和非降解RNA。转录组分析是理解细胞洞察力的一个重要过程。有几种高级的转录组分析方法。微阵列和RNA测序是两种用于分析转录组的技术。微阵列与RNA测序的关键区别在于,微阵列是基于预先设计的标记探针与靶cDNA序列的杂交潜力,而RNA测序是基于通过NGS等先进测序技术对cDNA链的直接测序。微阵列是利用序列的先验知识进行的,而RNA测序是在没有序列先验知识的情况下进行的。

内容1。概述和主要区别2。什么是微阵列3。什么是RNA序列4。并行比较——微阵列与RNA序列5。摘要

什么是微阵列(microarray)?

微阵列是一种稳健、可靠、高通量的转录组分析方法。这是目前最流行的转录分析方法。这是一种低成本的方法,它依赖于杂交探针。

该技术首先从样品中提取mRNA,然后从总RNA中构建cDNA文库。然后将其与荧光标记的预先设计的探针混合在固体表面(斑点矩阵)。互补序列与微阵列中的标记探针杂交。然后对微阵列进行清洗和筛选,并对图像进行量化。对收集到的数据进行分析,得到相对的表达式轮廓。

微阵列探针的强度假定与样本中转录物的数量成比例。然而,该技术的准确性取决于所设计的探针、序列的先验知识以及杂交探针的亲和力。因此微阵列技术有其局限性。微阵列技术不能用于低丰度转录。它不能区分亚型和识别遗传变异。由于这种方法依赖于探针的杂交,因此在微阵列技术中存在一些与杂交有关的问题,如杂交、非特**杂交等。

微阵列(microarray)和rna测序(rna sequencing)的区别

图01:微阵列

什么是rna测序(rna sequencing)?

RNA鸟枪测序(RNA-seq)是近年来发展起来的一种全转录组测序技术。这是一种快速、高通量的转录组分析方法。它直接量化基因的表达,并导致对转录组的深入研究。RNA序列不依赖于预先设计的探针或序列的先验知识。因此,RNA-seq方法具有较高的灵敏度和检测新基因和遗传变异的能力。

RNA测序法是通过几个步骤来完成的。细胞的总RNA必须分离并破碎。然后,利用逆转录酶制备cDNA文库。每个cDNA链必须与适配器连接。然后连接的片段必须被扩增和纯化。最后使用NGS方法,必须对cDNA进行测序。

微阵列(microarray)和rna测序(rna sequencing)的区别

图02:RNA测序

微阵列(microarray)和rna测序(rna sequencing)的区别

微阵列与RNA测序
微阵列是一种稳健、可靠、高通量的方法。 RNA测序是一种准确、高通量的方法。
成本
这是一种低成本的方法。 这是一种昂贵的方法。
大量样品分析
这有助于同时分析大量样本。 这有助于分析大量样本。
数据分析
数据分析很复杂。 这种方法生成的数据更多,因此过程更复杂。
序列的先验知识
这种杂交方法需要先验的杂交探针知识。 该方法不依赖于先验序列知识。
结构变异与新基因
这种方法不能检测结构变异和新基因。 这种方法可以检测基因融合、选择性剪接和新基因等结构变异。
敏感
这不能检测到异构体表达的差异,所以它的灵敏度有限。 这有很高的灵敏度。
结果
这只会导致相对表达式级别。这并不能给出基因表达的绝对量化。 它给出了绝对和相对的表达水平。
数据再分析
这需要重新运行才能重新分析。 测序数据可以重新分析。
对特定人员和基础设施的需求
微阵列不需要特定的基础设施和人员。 RNA测序所需的特定基础设施和人员。
技术问题
微阵列技术存在交叉杂交、非特**杂交、单个探针检测率有限等技术问题。 RNA序列技术避免了交叉杂交、非特**杂交、单个探针检测率有限等技术问题。
偏见
这是一种有偏见的方法,因为它依赖于杂交。 与微阵列相比,偏差较低。

总结 - 微阵列(microarray) vs. rna测序(rna sequencing)

微阵列和RNA测序方法是为转录组分析开发的高通量平台。这两种方法产生的结果与基因表达谱高度相关。然而,RNA测序在基因表达分析方面比微阵列有优势。RNA测序是一种比微阵列更灵敏的检测低丰度转录物的方法。RNA测序还可以区分异构体和识别基因变体。然而,由于RNA测序是一种新的昂贵的技术,具有数据存储和复杂数据分析的困难,因此微阵列是大多数研究者的共同选择。

R参考文献:1.王钟、马克·格斯坦和迈克尔·斯奈德。“RNA序列:转录组学的革命性工具”,《自然评论》。遗传学。U、 美国国家医学图书馆,2009年1月。网状物。2017年3月14日。罗勒、查尔斯E.、塔蒂亚娜·柴可夫斯卡娅、拉奎尔·诺尔、阿尔多·马西米、克里斯托弗·普莱西娅、尤根尼·鲁巴舍夫斯基、保罗·西伯特和莱斯利·E·罗勒。“RNA表达微阵列(REMs),一种高通量的方法来测量不同生物样本中基因表达的差异。”核酸研究。牛津大学出版社,2004年1月1日。网状物。2017年3月15日,赵尚荣,梁伟平,安东·比特纳,吴凯伦,刘学军。RNA序列和微阵列在活化T细胞转录组分析中的比较〉,《公共科学图书馆》一期。公共科学图书馆,2014年1月。网状物。2017年3月15日

  • 发表于 2020-10-26 21:16
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