如何冷冻干燥细菌培养物(冻干)(freeze-dry a bacterial culture (lyophilization))

冷冻干燥,也称为冻干或冷冻干燥,是将产品冷冻后的水分除去并置于真空中的过程。这使得冰从固体转变为蒸汽,而不经过液相。...

冷冻干燥,也称为冻干或冷冻干燥,是将产品冷冻后的水分除去并置于真空中的过程。这使得冰从固体转变为蒸汽,而不经过液相。

Bacteria cultures in red agar gel in petri dishes

冰(或其他冷冻溶剂)通过升华过程从产品中去除,结合水分子通过解吸过程去除。

冻干基础

长期保存细菌、真菌、酵母或其他微生物培养物的最佳方法之一是使用冷冻干燥过程。这一简短的实验室程序可与任何商用冷冻干燥机一起进行,以保存培养物收集。

由于冻干是最复杂和最昂贵的干燥形式,因此该过程通常仅限于精细、高价值的热敏材料。没有被冷冻损坏的物质通常可以冻干,因此不需要冷藏。

这个过程可能只需要三个小时,也可能长达24小时(不包括培养生长时间)。

你需要的产品

  • 冷冻干燥机
  • 高压灭菌器
  • 营养板或其他合适的琼脂板
  • 培养箱培养
  • 玻璃棒
  • 冻干缓冲液
  • 用橡胶塞(和压接器)压接顶部小瓶
  • 冷冻机

一步一步的冻干过程

  1. 在Luria肉汤或其他合适的营养琼脂平板上培养过夜的微生物或草坪。
  2. 提前通过高压灭菌(使用蒸汽、压力和热量进行灭菌的方法)准备无菌卷曲瓶盖,瓶盖(橡胶塞)松散地放在顶部。高压灭菌前,将印有培养物标识的纸质标签放置在试管内。或者,使用带有无菌盖的试管。
  3. 向平板中加入4毫升冻干缓冲液。如有必要,可使用无菌玻璃棒悬浮细胞。
  4. 迅速将培养液转移到灭菌瓶中。每小瓶添加约1.5毫升。用橡胶盖密封。
  5. 将培养液悬浮液置于零下20摄氏度的冰箱中,将其冷冻在小瓶内。
  6. 培养物冷冻后,打开冷冻干燥机,并留出时间使适当的温度和真空条件稳定下来,以准备冷冻干燥机。按照制造商关于您正在使用的特定品牌冷冻干燥机的说明进行此操作。
  7. 小心、无菌地将瓶盖松散地放在瓶盖上,以便在冷冻干燥过程中水分逸出。将小瓶放入冷冻干燥室中,并根据制造商的说明向干燥室施加真空。
  8. 让培养时间完全冻干(干燥)。根据每个样品的体积和样品的数量,这可能从几个小时到一夜之间不等。
  9. 根据制造商的说明从冷冻干燥室中取出样品,立即用橡胶盖密封小瓶,并卷曲顶部。
  10. 在室温下保存冻干培养物。

  • 发表于 2021-10-07 17:18
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  • 分类:化学

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