rt-pcr(rt pcr)和qpcr公司(qpcr)的區別
聚合酶鏈反應是一種在體外擴增特定區域DNA的技術。由於Kary Mullis在1983年發明了這項技術,科學家們能夠為研究目的複製數千到數百萬個特定的DN**段。目前,它已成為臨床和研究實驗室中常見的常規技術,有著廣泛的應用。傳統的PCR技術有RT-PCR、套式PCR、多重PCR、Q-PCR、RT-QPCR等多種方法,RT-PCR和Q-PCR是PCR的兩個重要變體。RT-PCR與Q-PCR的主要區別在於RT-PCR是通過RNA產生互補DNA(cDNA)轉錄物來檢測基因表達,而Q-PCR則是用熒光染料實時定量檢測PCR產物。
內容1。概述和主要區別2。什麼是RT-PCR 3。什麼是QPCR4。並行比較——RT PCR與QPCR5。摘要
什麼是rt-pcr(rt pcr)?
逆轉錄聚合酶鏈反應(RT-PCR)是PCR的一種變體,用於檢測RNA的表達。它是檢測組織中mRNA表達的一種非常重要的方法。當樣品的起始材料是RNA時,採用RT-PCR方法。在RT-PCR中,模板mRNA首先轉化為互補DNA。這一步是由反轉錄酶催化的,這個過程被稱為反轉錄。其次,對新合成的cDNA採用傳統的PCR方法進行擴增。
RT-PCR是一種高度敏感的技術,需要相對較少的RNA樣本。RT-PCR常用於RNA種類的診斷和定量,特別是RNA病毒,如人類免疫缺陷病毒和丙型肝炎病毒。
什麼是qpcr公司(qpcr)?
定量PCR(qpr)是PCR的一種變體,用於定量檢測PCR產物。由於它使用實時PCR機實時檢測擴增,因此也被稱為實時聚合酶鏈反應。它是一種確定樣本中存在的目標序列或基因數量的合適方法。QPCR的有趣特點是它將放大和真實量化結合到一個步驟中。因此,QPCR技術可以消除凝膠電泳檢測的必要性。qpr在PCR反應過程中使用熒光染料標記PCR產物,最終直接定量。當PCR產物積累時,熒光信號也會被累積,並由實時機器進行測量。QPCR可與RT-PCR結合。它被稱為RT-QPCR或QRT-PCR,被認為是檢測細胞或組織中RNA水平的最有力、最靈敏和定量的方法。
sybrgreen和Taqman是檢測或觀察實時PCR擴增過程的兩種方法。SYBR-Green法是用一種叫做SYBR-Green的熒光染料進行的,通過結合染料產生雙鏈DNA來檢測擴增。Taqman使用雙標記探針進行,並通過Taq聚合酶降解探針和釋放熒光團來檢測擴增,如圖02所示。兩種方法都可以監控放大過程的進度,並實時報告產品的數量。
實時PCR在基因表達定量、microRNA和非編碼RNA分析、SNP基因分型、拷貝數變異檢測、稀有突變檢測、轉基因生物檢測、傳染源檢測等方面有著廣泛的應用。
rt-pcr(rt pcr)和qpcr公司(qpcr)的區別
RT-PCR與QPCR | |
RT-PCR是一種通過擴增檢測基因表達的技術。 | QPCR是一種實時擴增DNA並定量PCR產物的技術。 |
逆轉錄酶的參與 | |
逆轉錄酶用於RT-PCR。 | 酶逆轉錄酶不用於QPCR。 |
熒光標記分子的使用 | |
熒光標記染料或探針不用於RT-PCR。 | 熒光標記染料或探針用於QPCR。 |
PCR產物的定量 | |
除非與QPCR結合,否則RT-PCR不能定量PCR產物。 | 定量測定PCR產物。 |
起始物料 | |
起始物質是mRNA。 | 起始物質是DNA。 |
cDNA的合成 | |
在RT-PCR過程中產生互補DNA。 | QPCR過程中不產生互補DNA。 |
總結 - rt-pcr(rt pcr) vs. qpcr公司(qpcr)
RT-PCR和QPCR是傳統PCR的兩個版本。逆轉錄聚合酶鏈反應(RT-PCR)技術是對mRNA樣品進行的,它是由反轉錄和cDNA的產生驅動的。QPCR用於熒光染料或標記探針在實時PCR熱循環中定量PCR產物。在QPCR中,PCR產物的數量由樣品發射的熒光信號來表示。RT-PCR是一種常用的擴增方法,QPCR則是一種常用的定量方法。這就是RT-PCR和QPCR的區別。
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